Innhold
Fluorescens in situ hybridisering (FISH) er en av flere teknikker som brukes til å søke i cellene deres DNA, på jakt etter tilstedeværelse eller fravær av spesifikke gener eller deler av gener.Mange forskjellige typer kreft er forbundet med kjente genetiske abnormiteter. Og etter genetisk snakker vi ikke bare om arv. I løpet av en levetid kan celler gjøre feil når de deler seg og vokser. Mutasjoner i DNA som er assosiert med kreft kan akkumuleres i disse cellene.
Hvordan det fungerer
FISH er en teknikk som bruker fluorescerende prober for å oppdage spesifikke gener eller deler av gener (DNA-sekvenser). Medisinsk senterlaboratorium og onkologer bruker FISH til å vurdere pasienter som kan ha kreft, og noen ganger for å overvåke en pasient som allerede har blitt diagnostisert med kreft og behandlet.
FISK kan gjøres ved hjelp av forskjellige typer prøver i henhold til lokalisering og hvilken type kreft som mistenkes: Tumorceller hentet fra perifert blod, fra en benmargsbiopsi eller fra en lymfeknutebiopsi, og formalinfiksert parafininnebygd vev (dette refererer til en prøve av vev som blir behandlet i laboratoriet og innebygd i en voks, noe som gjør den mer stiv, slik at den kan kuttes i tynne seksjoner og monteres for visning under mikroskopet).
Hva bokstavene betyr
“H” i FISH refererer til hybridisering. I molekylær hybridisering brukes en merket DNA- eller RNA-sekvens som en probe, visualiser en rød Lego-murstein, hvis du vil. Sonden brukes til å finne en motstykke Lego murstein, eller DNA-sekvens, i en biologisk prøve.
DNA i prøven din er som hauger med legoklosser, og de fleste murstein i disse haugene stemmer ikke overens med den røde sonden vår. Og alle mursteinene dine er pent organisert i 23 par mursteinbunker - hver haug er en av dine sammenkoblede homologe kromosomer, mer eller mindre. I motsetning til Lego-murstein er vår røde Lego-probe som en sterk magnet og finner sin match uten å måtte sortere gjennom haugene.
"F" refererer til fluorescens. Den røde sonden vår kan gå seg vill i mursteinene, så den er merket med farget fluorescerende fargestoff slik at den vil lyse. Når den finner samsvar mellom de 23 sammenkoblede haugene, avslører en fluorescerende merke sin plassering. Så du kan nå se hvordan forskere og klinikere kan bruke FISH for å identifisere hvor (hvilken haug eller hvilket kromosom) et bestemt gen er lokalisert for et gitt individ.
“Jeg” og “S” står for in situ. Dette refererer til det faktum at vår røde Lego-murstein leter etter matchen innenfor prøven du ga.
FISK og spesifikke blodkreftformer
FISK og annet in situ hybridiseringsprosedyrer brukes til å diagnostisere en rekke kromosomale abnormiteter - endringer i genetisk materiale, endringer i kromosomer, inkludert følgende:
- Sletting: en del av et kromosom er borte
- Translokasjon: en del av det ene kromosomet brytes av og fester seg på et annet kromosom
- Inversjon: en del av et kromosom brytes av og settes inn igjen, men i omvendt rekkefølge
- Kopiering: en del av et kromosom er tilstede i for mange kopier i cellen
Hver type kreft kan ha sitt eget sett med kromosomale endringer og relevante sonder. FISK hjelper ikke bare med å identifisere de opprinnelige genetiske endringene i en sykdomsprosess som kreft, men den kan også brukes til å overvåke respons på terapi og sykdomsremisjon.
De genetiske endringene oppdaget av FISH gir noen ganger tilleggsinformasjon om hvordan en persons kreft sannsynligvis vil oppføre seg, basert på det som tidligere har blitt observert hos mennesker med samme type kreft og lignende genetiske endringer. Noen ganger brukes FISH etter at diagnosen allerede er stilt, for å samle inn ytterligere informasjon som kan bidra til å forutsi pasientens utfall eller beste behandling.
FISH kan identifisere kromosomale abnormiteter i leukemier, inkludert kronisk lymfocytisk leukemi (CLL). For kronisk lymfocytisk leukemi / lite lymfocytisk lymfom tillater FISH pasienter å finne ut deres prognostiske kategori: god, middels eller dårlig. Ved akutt lymfoblastisk leukemi (ALL) kan genetikk av leukemicellene fortelle deg om risikonivået for kreft og hjelpe til med å veilede terapeutiske beslutninger.
FISH-paneler er også tilgjengelige for lymfom, multippelt myelom, plasmacelleproliferative lidelser og myelodysplastisk syndrom. For eksempel er det en mantelcellelymfom translokasjon at FISH kan oppdage kalt GH / CCND1 t (11; 14) som ofte er assosiert med dette lymfom.
Hvorfor FISK?
En fordel med FISH er at den ikke trenger å utføres på celler som deler seg aktivt. Cytogenetisk testing tar vanligvis omtrent tre uker, fordi kreftcellene må vokse i laboratorieretter i omtrent 2 uker før de kan testes. I motsetning er FISH-resultater vanligvis tilgjengelige fra laboratoriet i løpet av få dager.